《镖行天下之走单骑》的故事背景设定在明朝年间，一桩血腥的灭门惨案震惊了整个京城。这起惨案中，唯一幸存的是富翁周葵富的女儿采儿，她被父亲在临终前交托给天下镖局的王振威，希望他能够护送自己回到山西老家，向家族长老们揭露这起事件的真相。原来，这起惨案的幕后黑手竟是采儿的继母玉观音，她企图侵吞周葵富的全部财产。为了揭开真相，采儿决定踏上这段充满未知与危险的旅程。
